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大鼠免疫球蛋白M(IgM) ELISA试剂盒是基于什么样的原理

 更新时间:2023-07-16 点击量:294
  大鼠免疫球蛋白M(IgM) ELISA试剂盒的原理是基于酶联免疫吸附测定法(ELISA),它包括固相孔板、标准物质、样品和检测试剂。
  1. 固相孔板涂层:将特异性抗大鼠IgM的单克隆抗体或多克隆抗体固定在微孔板上,形成捕获抗体层。这些抗体可以与大鼠IgM特异性结合。
  2. 样品处理:需要对收集到的生物样本进行预处理,通常是对血清或其它组织液进行稀释,以确保测试结果可靠和准确。
  3. 反应过程:
  - 加入标准曲线样品和待测样品到不同的阱中。
  - 孵育:让适当时间内的溶液内发生反应,在适当温度下使得被检测物与捕获抗体结合。
  - 洗涤:去除未结合物质
  - 加入检测试剂:将辣根过氧化物酶(HRP)标记的第二抗体加入每个阱中,并与已经和目标分子结合在一起的分子形成一个复合物。
  - 孵育:让检测试剂和目标复合物在适当温度下发生反应,进一步增加信号强度。
  - 洗涤:去除未结合的检测试剂
  - 加入底物:加入含有HRP底物的溶液,在适当时间内产生可测量的颜色或发光信号。
  4. 反应读取与数据分析:使用专用设备(如酶标仪)对孔板上各阱中形成的颜色或荧光进行定量读取,并将结果与标准曲线进行比较,从而确定样品中大鼠IgM水平。
  通过该ELISA原理,可以灵敏地检测大鼠体内IgM抗体水平,并提供定量信息。