影响ELISA试剂盒曲线问题的原因有哪些？

　　Elisa生物试验是一种敏感性高，特异性强，重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存，操作简便，结果判断较客观等因素，已广泛应用在免疫学检验的各领域中。ELISA检测试剂盒适用于体外定性检测人血清或血浆中的抗人类戊型肝炎（HEV）病毒 IgM 抗体ELISA检测。

　　影响ELISA试剂盒曲线问题的原因有哪些？

　　标准曲线做的好与坏会直接影响到实验的结果，甚至是关系到实验的成败。我公司技术人员在处理售后的问题中，有不少科研朋友咨询曲线的问题，随后，技术人员将影响ELISA试剂盒曲线问题的原因做了总结：

　　一、OD值不正常的可能原因是：

　　1、试剂盒未回温，试剂盒回温到25℃；

　　2、温度控制不好，控制正确温度；

　　3、孵育时间不，控制孵育时间；

　　4、洗涤时冲击力太大、浸泡时间过长、洗涤次数增 加，洗涤4-5次，每孔250ul，然后拍干；

　　5、阳光直射，对着风直接吹，避风避；

　　6、酶标仪的波长错误，酶标仪的波长450nm；

　　7、抗体的稀释错误，正确的稀释抗体；

　　8、水质问题，用娃哈哈矿泉水代替。

　　二、白板的可能原因是：

　　1、洗涤液配制错误，正确的配制洗涤液；

　　2、少加液体（错加液体），正确的步骤加液体。

　　三、无梯度可能原因是：

　　1、标准品也污染，换标准品点板；

　　2、OD值不正常，控制温度时间在做一次；

　　3、人为点板，不要点板。

　　四 线性不好可能原因是：OD值不正常，控制温度时间在做一次。